レイン・エクエイションタンパク質濃度計算機

Layneの式は、2つの異なる波長（280nmと260nm）での吸光度を測定することで、溶液中のタンパク質濃度を決定する方法を提供します。この式は、試料中のタンパク質を定量化するために、生化学や分子生物学で特に役立ちます。

歴史的背景

Layneの式は、試料中のタンパク質と核酸の濃度を、それらの特定の吸光特性によって推定できるという原理に基づいています。タンパク質は、トリプトファン、チロシン、フェニルアラニン残基の存在により、主に280nmで吸収され、一方核酸は260nmで吸収されます。

計算式

Layneの式を使用してタンパク質濃度を計算するための式は、以下のように表されます。

\[ P = 1.55 \times A{280} - 0.76 \times A{260} \]

ここで：

• \(P\)は、タンパク質濃度（mg/mL）、
• \(A_{280}\)は、280nmでの吸光度、
• \(A_{260}\)は、260nmでの吸光度です。

例題計算

280nmでの吸光度（\(A{280}\)）が0.500で、260nmでの吸光度（\(A{260}\)）が0.300の場合、タンパク質濃度（\(P\)）は以下のように計算されます。

\[ P = 1.55 \times 0.500 - 0.76 \times 0.300 = 0.772 \text{ mg/mL} \]

重要性と使用シナリオ

この式は、精製プロセス中やタンパク質発現の効率を評価する場合など、試料中のタンパク質濃度を迅速かつ正確に定量化する必要がある研究者にとって不可欠です。

よくある質問

1. タンパク質定量におけるA280とA260の重要性は何ですか？

   • A280はタンパク質含有量による吸光度を測定し、A260は核酸による吸光度を測定します。それらの比と個々の値は、核酸汚染を修正してタンパク質濃度を推定するのに役立ちます。

2. タンパク質定量におけるLayneの式の精度はどのくらいですか？

   • 精度は、試料の純度と、これらの波長でも吸収する可能性のある物質の存在によって異なります。迅速な推定のための広く受け入れられている方法ですが、正確な定量のために他の方法と一緒に使用されるべきです。

3. Layneの式はどのタンパク質にも使用できますか？

   • はい、しかしトリプトファン、チロシン、フェニルアラニンを含むタンパク質で最も正確です。これらのアミノ酸を欠くタンパク質の場合、代替方法がより適切な場合があります。

この計算機は、Layneの式を使用してタンパク質濃度を推定するプロセスを合理化し、さまざまな科学的および研究的コンテキストにおけるその応用を容易にします。