Калькулятор концентрации белка по уравнению Лейна

Уравнение Лэйна - это метод определения концентрации белка в растворе путем измерения поглощения при двух различных длинах волн, 280 нм и 260 нм. Это уравнение особенно полезно в биохимии и молекулярной биологии для количественной оценки белков в образцах.

Историческая справка

Уравнение Лэйна основано на принципе, что концентрацию белка и нуклеиновой кислоты в образце можно оценить по их специфическим свойствам поглощения. Белки, в первую очередь, поглощают при 280 нм из-за наличия остатков триптофана, тирозина и фенилаланина, в то время как нуклеиновые кислоты поглощают при 260 нм.

Формула расчета

Формула для расчета концентрации белка с помощью уравнения Лэйна выглядит следующим образом:

\[ P = 1.55 \times A{280} - 0.76 \times A{260} \]

где:

• \(P\) - концентрация белка в мг/мл,
• \(A_{280}\) - поглощение при 280 нм,
• \(A_{260}\) - поглощение при 260 нм.

Пример расчета

Если поглощение при 280 нм (\(A{280}\)) равно 0,500, а поглощение при 260 нм (\(A{260}\)) равно 0,300, концентрация белка (\(P\)) рассчитывается следующим образом:

\[ P = 1.55 \times 0.500 - 0.76 \times 0.300 = 0.772 \text{ мг/мл} \]

Важность и сценарии использования

Это уравнение имеет решающее значение для исследователей, которым необходимо быстро и точно количественно оценивать концентрацию белка в их образцах, например, во время процесса очистки или при оценке эффективности экспрессии белка.

Часто задаваемые вопросы

1. Каково значение A280 и A260 в количественной оценке белка?

   • A280 измеряет поглощение за счет содержания белка, в то время как A260 измеряет поглощение за счет нуклеиновых кислот. Их соотношение и отдельные значения помогают оценить концентрацию белка с поправками на загрязнение нуклеиновой кислотой.

2. Насколько точным является уравнение Лэйна для количественной оценки белка?

   • Точность зависит от чистоты образца и наличия веществ, которые также могут поглощать при этих длинах волн. Это широко принятый метод для быстрых оценок, но его следует использовать наряду с другими методами для точного количественного определения.

3. Можно ли использовать уравнение Лэйна для любого белка?

   • Да, но оно наиболее точное для белков, которые содержат триптофан, тирозин и фенилаланин. Для белков, не имеющих этих аминокислот, альтернативные методы могут быть более подходящими.

Этот калькулятор оптимизирует процесс оценки концентрации белка с помощью уравнения Лэйна, облегчая его применение в различных научных и исследовательских контекстах.